PCR greining: hvað er það? Hvernig á að taka PCR greiningu

Það er ekki svo langt síðan þróað áreiðanlega, mjög næmur og hröð aðferð til greiningar á ýmsum smitsjúkdómum í mönnum. Slík aðferð er kölluð "PCR greiningu". Hvað er það, hvað er kjarni hennar, sem hann getur borið kennsl á örverur og hvernig á að taka það, munum við lýsa í þessari grein.

Saga af uppgötvun

Sér í sér keðjuverkandi fjölliðun DNA (PCR) er bandarísk vísindamaður Keri Myullis árið 1983. Í upphafi, er einkaleyfi aðferð við að greiningar með því að "Cetus Corporation," þar sem hann vann og skapari þess. En árið 1992 öll réttindi og einkaleyfi voru seld fyrirtækinu "Hoffman-La Roche." Eftir það sneri það út að svipaðar rannsóknir voru gerðar á hliðstæðan hátt og var greint með öðrum bandarískum líffræðingar, svo sem Elis Chen, David Edgar, John rre. Árið 1980 hann þátt í þessu máli og Sovétríkjanna vísindamenn A. Slyusarenko A. Kaledin og S. Gorodetsky. Því, til að ákvarða eini höfundarréttur eigandi hefur ekki verið hægt. Margir framúrskarandi biochemists hafa stuðlað að þróun aðferða við viðbrögð pólýmerasa og CERN einkaleyfi nýjungar sínar. Á þessum tímapunkti greiningar PCR fer fram í gegn um sérútbúnum rannsóknarstofum.

SUMMARY PCR sjúkdómsgreiningar

PCR greining: hvað er það og hvernig virkar það? Kjarni aðferðarinnar liggur í þeirri staðreynd að með því að nota sérstaka ensím DNA pólýmerasa in vitro að auka á rúmmáli tilteknu örvera umhverfi. Til að gera þetta aftur og aftur margfalda boði DNA efni. Þannig, að viðstöddum lifandi smitefni í úrtaki upphæð verði aukin á kostnað líffræðilegt rannsóknarstofu meðferð, og bakteríur mun ekki vera erfitt að greina í smásjá.

Hvernig er rannsókn á efninu?

Til að framkvæma greiningu þarf:

• DNA sniðmátið;
• grunnur efni tengja enda i hlutanum;
• hitastöðugur DNA pólýmerasa ensím;
• efni, tryggja rétta virkni ensíma;
• stuðpúðalausn er nauðsynlegt til að búa til viðeigandi aðstæður fyrir vöxt og þroska DNA efni.

Til að framkvæma PCR reka 25-30 endurtekningar samanstendur af þremur þrepum: eðlisbreytingu, annealing og lengingu.

Til að greina polimezarnoy keðjuverkun með því að nota sérstakt tæki - cycler. Nútíma búnaði er hægt að setja upp nauðsynlegan upphitun og kælingu slöngur forrit til að útrýma villum í greiningu.

Hvar á að beita greiningu?

Polimezarnoy keðjuverkun aðferð eru notuð í ýmsum sviðum læknisfræðinnar:

• Réttar nota það til að bera kennsl á erfðaefni, eins og hár, munnvatni eða blóð;
• PCR greiningar á blóði hjálpar til við að arfgerða, t.d. til að greina einstakra erfðafræðilega plantað vegna tiltekinnar lyfs;
• með aðferð setja fjölskyldutengsl milli fólks;
• sought-PCR aðferð hefur orðið til sjúkdómsgreininga ákvarða ýmsum smitsjúkdómum.

Hvað sýkingar ljós PCR?

Þannig lyf hefur lengi verið notað PCR greiningu. Hvað er það, sem við höfum nú þegar lært. Og sumir sýklar geta verið greind með það? PCR greinist eftirfarandi sýkingum :

• lifrarbólgu A, B, C;
• ureaplasmosis;
• hvítsveppasýkingu;
• Chlamydia;
• mycoplasmosis;
• bakteríu vaginosis;
• smitandi mononucleosis;
• trichomoniasis;
• HPV sýkingu;
• berklar;
• herpes sýking í 1. og 2. tegund;
• Helicobacter pylori sýkingu;
• CMV;
• barnaveiki;
• Salmonella;
• HIV sýkingu.

Einnig eru PCR aðferðir sem notaðar eru við greiningu á krabbameini.

Kosturinn við aðferðina

Diagnostic PCR hefur nokkra kosti:

1. High næmi. Jafnvel með aðeins nokkrum DNA-sameindum, örveru í PCR greining ákvarðar nærveru sýkingu. Það hjálpar aðferð fyrir stöðugan fasta og duldum sjúkdóma sem verða. Oft í slíkum tilvikum, sem örveran er uncultivated á annan hátt.
2. Til þess að rannsaka hvaða til þess fallna efni á borð við munnvatn, blóð, kynferðislegt val, hár, þekjufrumum. Algengasta er blóðprufa og þvag þurrku PCR.

3. Ekki þarf extended vaxandi menningu. The gera sjálfvirkan Ferlið við diagnosis gerir til að fá niðurstöður rannsóknar eftir 4-5 klukkustundir.
4. Aðferðin er næstum alveg ekta. Skráð Aðeins í einstökum tilvikum af fölskum-neikvæða niðurstöðu.
5. Hæfni til að greina nokkrar tegundir sýkla í einu sýni efninu. Þetta flýtir ekki aðeins að því ferli greiningu sjúkdómsins, en einnig verulega dregur úr efniskostnað. Oft læknirinn ávísar alhliða greiningu á PCR. Verð könnun, sem samanstendur af ákvarða sex sýkla, er um 1500 rúblur.

Tilmæli um undirbúning fyrir greiningu

Niðurstöðurnar úr gildi voru PCR rannsóknir séu nauðsynlegar sem á að prófa, samkvæmt leiðbeiningum frá bráðabirgðaniðurstöðum undirbúning fyrir greiningu:

1. Fyrir afhendingu munnvatni ætti að láta vera að borða og lyf við að 4 klukkustundir á undan til að taka sýni af efni. Strax fyrir aðgerð, skola munninn með soðnu vatni.
2. Framangreindar reglur skulu taka mið og þegar taka sýni úr innanverðum kinn. Eftir skolun er mælt með því að framkvæma létt nudd á húð til að losa blöðruhálskirtils seyti.
3. Þvag er yfirleitt safnað heima. Til að gera þetta, þú þarft að framkvæma ítarlega salerni á kynfærum. In a atarlle plastílát er nauðsynlegt að safna 50-60 ml af þvagi. Það er mælt með að konur setja tíðatappi í leggöngin, og menn eins mikið og mögulegt er til að draga í húðfellingu að tryggja hreinleika efnisins. Þú getur ekki tekið efni á tíða.
4. Til afhendingar á sæði að halda sig frá samfarir á 3 dögum áður en söfnun efnis. Einnig eru læknar hvattir til að yfirgefa notkun gufubaði og heitum baði, áfengi og sterkan mat. Í 3 tíma áður en greining er nauðsynlegt til að forðast þvaglát.
5. Til að standast þvag frumustrok, til dæmis, ef greiningin á klamydíu PCR, bæði konur og karlar er ráðlegt að kynferðislega hvíld í 3 daga. 2 vikur áður en greining getur ekki tekið sýklalyf. Fyrir viku þarftu að hætta að nota náinn hlaup, smyrsl, leggöngum stílar, douching. 3 klst áður en rannsóknin ættu að forðast þvaglát. Á tíðir girðing efni fer ekki fram, aðeins 3 dögum eftir uppsögn blettablæðingum getur tekið þvag- eða kynfærum frumustrok.

PCR á meðgöngu

Biðtíminn fyrir barnið, margir smitsjúkdómar, kynsjúkdóma, eru mjög hættulegar fyrir eðlilega fósturs. Kynsjúkdómar geta kallað legi þróun, fósturláti eða fæðingu fyrir tímann, meðfæddri vansköpun barnsins. Því er mikilvægt að fá snemma á meðgöngu skimun PCR. Pass greining er nauðsynlegt þegar þú skráir - allt að 12 vikur.

Fence efni kemur frá legháls með sérstökum bursta. The aðferð er sársaukalaus og sitja ekki hættu fyrir barnið. Venjulega á meðgöngu greind með tilliti til Chlamydia PCR aðferð, sem og ureaplasmosis, mycoplasmosis, cytomegalovirus, herpes, mannapapillomaveiru. Slík athugun flókið heitir PCR 6.

PCR til greiningar á HIV

Vegna þess að sú aðferð sem hvarfsins polymerase chain er mjög næmur fyrir breytingum í líkamanum; skilyrði frá greiningu, margir þættir geta haft áhrif á útkomuna. Því PCR Efnagreining á HIV sýking er ekki áreiðanleg aðferð, skilvirkni hennar - 96-98%. Eftirstöðvar 2-4% af prófinu gefur falskar jákvæðar niðurstöður.

En í sumum tilvikum án PCR greiningar á HIV getur ekki gert. Venjulega, það er framkvæmt til fólks með fölskum-neikvæð ELISA. Þessar tölur benda til þess að maður hefur ekki enn þróað mótefni gegn veirunni og ekki hægt að greina án þess að auka fjölda mörgum. Að þetta getur verið náð með því að stunda blóðprufu PCR aðferð.

Einnig þarf er greining á börnum á fyrsta ári af lífi, fæddur í HIV-smitaðar mæður. Aðferðin er eina leiðin til að áreiðanlegum ákvarða stöðu barnsins.

PCR til greiningar á lifrarbólgu

Polymerase chain reaction aðferð gerir kleift greina DNA á veirunni lifrarbólgu A, B, C, vel fyrir myndun mótefna til sýking eða einkenni komu fram. Sérstaklega árangursríkt er PCR greining á lifrarbólgu C, þar sem 85% af slíkum sjúkdóm eru einkennalaus og án þess að tímanlega meðferð verður langvarandi.

Tímabær greining sýklinum mun hjálpa að forðast fylgikvilla og langtíma meðferð.

Innbyggt PCR skimun

Alhliða PCR Analysis: hvað er það? Þessi aðferð til skimunar polimezarnoy kemur keðjuverkun sem felur í sér að ákvarða á sama tíma og nokkrar tegundir sýkingu: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, Trichomonas, cytomegalovirus, Ureaplasma urealitikum, herpes 1 og 2 gerð, lekandi vörtuveiru. Verð á þessa greiningu á bilinu 2.000 til 3.500 rúblur. allt eftir læknls, efni og tækjum, svo og á the tegund af greiningu: eigindlegri eða megindlegri. Hvað er þörf í þínu tilviki - læknirinn ákveður. Í sumum tilvikum, þú bara einfaldlega að greina tilvist sjúkdómsvalda í aðra, svo sem HIV, mikilvægur þáttur tölulegum títra. sem vísað er til sem "PCR greiningu á 12" við sjúkdómsgreiningu á allar ofangreindar sýkingarvöldum skoðun.

Deciphering um niðurstöður greininga

Uppskrift PCR greining er einföld. Það eru aðeins 2 Vísitala mælikvarða - ". Neikvæð" "jákvæð" og Við greiningu á sjúkdómsvalda er hægt læknar með 99% öryggi -th staðfesta tilvist sjúkdómsins og að byrja meðhöndlun sjúklingsins. Í megindlegu aðferð við ákvörðun-sýkingu í samsvarandi dálki rita númer greindu baktería verður tilgreind. Aðeins læknir getur ákvarða umfang sjúkdómsins og mæla fyrir um nauðsynlega meðferð.

Í sumum tilvikum, til dæmis í að ákvarða HIV sýkingu með PCR, með neikvæðum niðurstöðum, það er þörf fyrir frekari kannanir til að staðfesta þessar tölur.

Hvar á að fá prófað?

Þar fara-PCR greiningu á opinberum heilsugæslustöð eða einkaaðila rannsóknarstofu? Því miður, í sveitarfélögum sjúkrastofnunum búnaði og aðferðum eru oft gamaldags. Þess vegna er betra að gefa val til einkaaðila rannsóknarstofum með nútíma tækjum og mjög hæfu starfsfólki. Að auki, í lokuðu heilsugæslustöð þú færð þær niðurstöður mun hraðar.

Í Moskvu, bjóða margir persónulegur rannsóknarstofur PCR greiningu fyrir ýmsum sýkingum. Til dæmis, í slíkum heilsugæslustöð sem "Vita", "Integrated Clinic", "Til hamingju Family", "Uro-Pro", framkvæmt PCR greiningu. Könnun verðið er 200 rúblur. til að ákvarða sjúkdómsvalda.

Það má draga þá ályktun að greining smitsjúkdóma með PCR í flestum tilfellum er fljótleg og áreiðanleg leið til að greina sjúkdómsvalda í líkamanum á fyrstu stigum sýkingar. Enn, í vissum tilvikum, til að velja aðrar aðferðir við greiningu. Ákveða þörf fyrir slíka rannsókn getur aðeins verið sérfræðingur. PCR greining decryption krefst einnig faglega nálgun. Fylgdu ráðleggingum læknisins og ekki gefast eigin próf þeirra, sem eru ekki þörf.